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Fig. Modeling:Acetic acid was injected into the colon
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产品包装(模拟)
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产品包装(模拟)
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通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证
肠易激综合征(IBS)大鼠模型
Rat Model for Irritable Bowel Syndrome (IBS)
- 编号DSI533Ra01
- 物种Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
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- 规格 每例
- 价格 ¥ 1320
- 原型物种人
- 来源束缚应激致肠易激综合征
- 模式动物品系SPF级SD大鼠，健康，4~6W，雄性，体重为180g-200g。
- 实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
- 实验周期4-6 weeks
- 建模方法束缚应激法法建立IBS-D模型：大鼠适应性饲养一周，实验前12h禁食。
大鼠在Day1乙醚吸入麻醉后经肛门插入连接注射器的硅胶管(距肛门8cm)，结肠内灌入40mg/L的乙酸1mL，然后缓慢拔出硅胶管，用手压迫肛门并将大鼠尾巴抬高30S，然后用0.01 mol/L PBS 1mL冲洗结肠。A组大鼠用等体积PBS替代乙酸作相同灌肠处理。然后各组大鼠恢复6天（至Day6）。
大鼠于Day7-Day9给予束缚应激。实验前将大鼠置入限制性鼠笼束缚应激30 min（将大鼠置于限制起肢体但不影响其呼吸的特制透明圆柱形筒内）。对照组置于安静、温暖(18～20℃)、避强光的环境中喂养，自由饮水、摄食。 - 应用可用于研发预防和治疗肠易激综合征的药物，如益生菌等等。
1.一般情况观察：
观察大鼠皮毛色泽、精神状态及活动度。
2.体质量增长率计算：
适应性饲养结束后秤取实验大鼠体质量作为初始体质量，实验期间观测每日体质量，求得体质量增长率。
体质量增长率=(当日体质量一初始体质量)／初始体质量x100％。
3.粪便颗粒数和4粪便干湿重比
于Day1、Day3、Day5、Day7-9收集每只大鼠的2个小时的粪便（固定时间点9:00~11:00），统计2个小时的排便颗粒数。于Day1、Day3、Day5、Day7-9取每只大鼠的1~2粒粪便，称湿重称质量后置于50度恒温箱烘烤 ，再称干重。
粪便含水量= (湿重-干重)/湿重x100%。
腹壁撤退反射（AWR评分）
AWR评分于Day9进行。大鼠在实验前24 h禁食不禁水，轻触其肛门部使其排尽大便。大鼠轻度麻醉状态下从肛门缓慢插入未充气涂石蜡油后带球囊的导管，球囊末端距肛门约1 cm，在肛门外1cm处将其固定在大鼠尾根部后。每只大鼠给与球囊扩张3次，容量分别为1.0、1.5、2.0 ml，每次扩张持续3-5 min，间隔30 s（以防肠道缺血）。每个容量重复3次，取平均值。
4.AWR评分标准：0分，给予结直肠扩张刺激时大鼠情绪基本稳定；1分，给予刺激时变得不稳定，偶尔扭动头部；2分，腹背部肌肉轻微收缩但腹部未抬离地面；3分，腹背部肌肉较强烈收缩并把腹部抬离地面；4分，腹部肌肉强烈收缩，腹部呈弓形并把腹部、会阴部抬离地面。
AWR评分标准：
0分，给予结直肠扩张刺激时大鼠情绪基本稳定；
1分，给予刺激时变得不稳定，偶尔扭动头部；
2分，腹背部肌肉轻微收缩但腹部未抬离地面；
3分，腹背部肌肉较强烈收缩并把腹部抬离地面；
4分，腹部肌肉强烈收缩，腹部呈弓形并把腹部、会阴部抬离地面。
5.旷场实验检测大鼠的自主行为
旷场实验所用实验箱为高30~40cm，底边长为100 cm的旷场，周壁的颜色为黑色，旷场底面被平均分为25个4×4 cm的小方格。正上方架摄像头，视野覆盖整个旷场。将大鼠放置在正中央格，同时进行摄像和计时，时间为5 min。通过计算机示踪分析系统来分析大鼠在一定时间内的活动状态。实验室要保持安静，室温为20 ℃左右，光线充足。观察指标：方格间穿行次数（动物的四肢从一个格进入另一个格为穿行一次）、直立次数（动物双前肢同时离地，或者双前肢放在墙壁上算作直立一次）、中央格停留时间、穿过中央格的次数。
研究认为，经过的格子数代表动物的兴奋性；站立的次数代表动物对陌生环境的适应能力。
6.胃排空测定
每只大鼠于Day10给予2ml阿拉伯胶+活性炭粉混合糊状物灌胃，30min后处死并开腹，自门至为肠吻合口取胃，称胃全重以及胃净重。
胃排空率（100%）：（1-（胃全重-胃净重）/炭粉混合糊状物重）x100%。
7.小肠推进比测定
将大鼠取出上端自幽门、下端至回盲部的肠管，铺直后测量幽门至回盲部全长(小肠总长度)及幽门至炭末前沿的距离(炭末推进长度)，计算小肠推进百分率：
小肠推进比（100%）=活性炭推进距离/小肠全长x100%。
取材：
将大鼠处死，取结肠，在距肝门口2cm出取结肠组织，分为2份，一份10%中性甲醛溶液固定。另一份放置-80度保存，可进行后续分子生物学检测。
处死大鼠，大鼠仰卧固定在手术台上，充分暴露腹主动脉，用真空采血管从从腹部主动脉采血，收集血液后，室温静2h，然后于4℃3000r离心10分钟提取血清，放入-80冰箱冻存。
结肠组织进行石蜡包埋，切片（5um），进行HE染色。
应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显
