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特发性血小板减少性紫癜(ITP)小鼠模型

Mouse Model for Idiopathic Thrombocytopenia Purpura (ITP)

  • 编号DSI535Mu01
  • 物种Mus musculus (Mouse,小鼠)
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  • 规格 每例
  • 价格 ¥ 600
基础信息
  • 原型物种
  • 来源注射 GP-APS导致特发性紫癜
  • 模式动物品系SPF级Balb/C小鼠,雄性,周龄为8w-10w,体重为30g-35g。
  • 实验分组实验分六组:正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
  • 实验周期4-6 weeks
  • 建模方法一、分离血小板的方案:
    小鼠眶静脉取血,置于抗凝离心管中,静置30min后离心,800rpm离心10min,上清液即为富含血小板的血浆。吸出上清液置于干净试管中,3500rpm离心10min,弃去上清液,管底沉淀物为血小板。向试管中滴加50~100μl质量浓度为1%草酸铵溶液,以玻璃棒轻轻搅拌,再加入质量浓度为1%草酸铵溶液2~3ml,静置5min,使红细胞溶解。3500rpm离心10min,弃去上清,加入血小板洗涤液并反复吹打,使成为血小板混悬液,3300rpm离心10min,弃去上清,加入少量血小板洗涤液并反复吹打使之成为混 悬液。该血小板将作为抗原免疫豚鼠后,取豚鼠血清给小鼠注射,制备过敏性紫癜模型。此方法操作简单,可以得到高浓度的血小板,并很好地解决血小板 纯度不佳的问题。
    二、抗体血清免疫豚鼠:
    1.取以上血小板与等量完全弗氏佐剂混合,乳化油包水状,于0周注射豚鼠足掌,背,皮下至少4点;
    2.血小板于等量不完全弗氏佐剂混合,乳化油包水状,于1,2,4周注射豚鼠足掌,背,皮下至少4点,每个点100ul;
    3.第5周从豚鼠心脏取血,3000r/min 离心10min后取上清,即为豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS);
    4.置56度水浴30min补体灭活,生理盐水稀释后,-20度冰箱储存备用。
    三、小鼠紫癜建模方案:
    隔日注射豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)建立ITP小鼠模型,0,2,4,6,8,10d按照100ul/20g体重腹腔注射1:4稀释的豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)。
  • 应用疾病模型
模型评价

一般体征:自第2次注射APS后,各组造模后小鼠出现明显皮下紫癜,以注射部位、四肢、尾部为重。第4d开始逐渐出现精神萎靡、眯眼、扎堆、反应迟钝、行动迟缓,甚至行走不稳,毛色枯槁、散乱竖起,饮食饮水量减少,逐渐消瘦,体质量减轻等症状。
观察指标及检测方法:观察实验中小鼠的精神活动状况、 出血情况、 皮毛光泽、饮食饮水量、大小便、体质量变化及死亡情况;

组织病理学

实验结束后 (实验第lld), 眼球取血,全自动血细胞计数分析仪检测外周血象, 流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群。剥离胸骨,取胸骨骨髓涂片,瑞氏染色。

统计学分析

应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显

资质许可 动物防疫条件合格证 实验动物生产许可证 实验动物使用许可证
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