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  • 慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型 慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型
  • 慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型 产品包装(模拟)
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  • Certificate 通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型

Rat Model for Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD)

  • 编号DSI557Ra02
  • 物种Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
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  • 规格 每例
  • 价格 ¥ 720
基础信息
  • 原型物种
  • 来源吸烟致慢性阻塞性肺病
  • 模式动物品系SPF级SD大鼠,健康,3-4W,雄性,体重为190-230g。
  • 实验分组实验分两组:正常对照组和模型组。
  • 实验周期4 weeks
  • 建模方法1. 第1天、第14天将大鼠用乙醚吸入麻醉后,暴露喉头,以静脉套管针替代气管导管行气管插管,向大鼠气管内注入200 μg/kg(200 μg/ml溶于生理盐水中) LPS(lipopolysaccharide,脂多糖),完毕后将大鼠直立旋转10-20s,使LPS均匀分布于肺部。
    2. 第2-13天,15-28天,每天在有机玻璃密闭箱(70×60×60cm3)持续吸入新鲜的香烟雾45min,15支/天,使密闭箱烟雾浓度约为100-120 mg/m3。每天熏烟后立刻用低于环境温度(20℃)5℃冷空气刺激1小时,造模28天结束。
  • 应用疾病模型
模型评价

1. 观察各组大鼠的活动量、毛发、食量、呼吸、体重等。每周给食前1h称重,观察体重的变化。
2. RT-qPCR检测
收集大鼠PBMC和肺组织,提取RNA,利用RT-PCR检测Foxp3、RORγT的表达。
3. Western blot检测
收集大鼠PBMC和肺组织,提取蛋白,采用western-blot检测TAZ水平。
4. 流式细胞检测外周血T淋巴细胞亚群
收集各组大鼠腹主动脉血2ml左右,利用大鼠外周血淋巴细胞分离液提取外周血单个核细胞(PBMC)细胞悬液。
(1)检测Th17时,细胞悬液加入佛波酯(50ng/ml)、离子霉素(1μg/ml)和莫能菌素(2μmol/L),37℃、5%CO2培养箱终培养6h后,反复洗涤3次后100μL PBS重悬,然后加入CD4单克隆抗体10μL,混匀后4℃避光孵育30min,洗涤、固定、破膜,再加入IL-17单克隆抗体10μL,4℃避光孵育20min,反复洗涤后PBS重悬为500μL/管,样品置流式细胞仪检测CD4+IL-17+细胞占CD4+T细胞的比例。
(2)检测Treg细胞时,细胞悬液先加入CD4、CD25单克隆抗体各10μl,混匀后4℃避光孵育30min,洗涤、固定、破膜,再加入FoxP3单克隆抗体10μL,4℃避光孵育20min,反复洗涤后PBS重悬为500μL/管,样品置流式细胞仪检测CD4+CD25+FoxP3+细胞占CD4+T细胞的比例。

组织病理学

HE染色:右肺叶组织固定包埋切片,HE染色,观察肺组织病理变化情况。

标志因子水平

ELISA检测:
检测血清和支气管肺泡灌洗液中的IL-17和IL-10水平。
支气管肺泡灌洗液(BALF)抽取方法:大鼠取血后,开胸,分离纵膈,注射器抽取3ml生理盐水从气管插管推入肺中,每次反复灌洗3次后抽出灌洗液,肺泡灌洗液以4℃ 3000r/min离心15min,取上清。
血清提取方法:将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置 2 小时或 4oC 过夜,然后 1,000×g 离心 20 分钟,取上清即可,将上清置于-20oC 或-80oC 保存,避免反复冻融。

统计学分析

应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显

资质许可 动物防疫条件合格证 实验动物生产许可证 实验动物使用许可证
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