1. 慢性阻塞性肺疾病

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一种常见的以持续气流受限为特征的、可预防可治疗的疾病，致残率和病死率很高。

    1.1 建模方法：

主要试剂： 红金龙香烟（湖北中烟工业有限责任公司生产，烤烟型，每支含焦油量9mg、烟气烟碱量0.7mg、烟气一氧化碳量12mg），脂多糖（lipopolysaccharide，LPS，美国Sigma公司），TNF-alpha和IL-8 ELISA试剂盒cloud-clone公司）

SPF级Balb/c雌性小鼠，体重约20g。采用鼻腔滴入 LPS 加熏香烟的方法建立 COPD模型。

分别于第 1天、29天经鼻腔滴入LPS（30μg/6μL）；第2-30 天（除第 29 天）采取熏香烟法：将小鼠放入自制的玻璃熏箱，10 支/次，30min/次，5d/周，持续4周。

    1.2 模型鉴定：

与对照组相比，模型组小鼠毛发无光泽，部分有脱毛现象、躁动，熏烟时喜扎堆，倦怠蜷缩，汗出，腹部胀大，呼吸急促，出现点头运动，甚者张口呼吸明显。

    1.3 造模后续检测：

        1.3.1 细胞因子检测

最后一次烟熏完后 24 小时处死，1%戊巴比妥钠（按 0.05mL/10g）腹腔麻醉小鼠，将小鼠腹主动脉取血法取血1mL或支气管肺泡灌洗液，室温下放置2h后，2 000r/min离心20min，取血清，-20℃保存备用。按 ELISA 试剂盒操作步骤说明检测小鼠血清中 TNFα、IL-8 的含量。

结果显示：与空白组对比，COPD小鼠血清中TNFa、IL-8有显著增高。 

图1. COPD小鼠相对于空白组小鼠血清中TNFa和IL-8水平对比

        1.3.2 肺组织形态学检测。

腹腔麻醉小鼠后，开胸暴露胸腔：取左侧肺叶固定于 10%甲醛溶液24h，常规脱水石蜡包埋，切片行 HE 染色，光镜下观察。

结果显示：空白对照组小鼠肺泡结构清晰，肺泡大小均匀，气道黏膜上皮结构完整，纤毛排列整齐；模型对照组小鼠部分肺泡壁塌陷，肺泡不规则扩大并相互融合，形成肺大泡，肺间质内可见不同程度的炎性细胞浸润，支气管黏膜上皮脱落，黏膜皱襞增多，突入管腔，纤毛黏缩，管腔变窄，符合 COPD 病理改变。

图2. COPD小鼠(右)相对于对照组小鼠（左）肺部组织HE染色对比