一、实验器材及试剂

1、 实验器材

2、 主要实验试剂

二、 OCT包埋

1. 新鲜组织取材后，按实验目的进行修剪。应在离体30min内进行快速OCT包埋。

2. 包埋盒底部滴入OCT，覆盖包埋盒的底部。

3. 将组织放入包埋盒中，根据组织形状调整组织的位置。组织上覆盖OCT，将组织完全覆盖。避免产生气泡。

三、冰冻切片

1. 组织块固定在切片机上，调节冰冻温度调节器，在冷冻台上冰冻组织块。室温停留片刻，再进行切片。

2. 调整切片机刀片到适当的位置和角度，试切出完整连续的切片以确定最合适的条件。

3. 正式切片前应先对组织块修片并暴露出需要的切面。进行快速连续切片，选择合适的切片附贴在载玻片上，并做好标记。

4. 剩余冰冻组织干燥后放入冰冻切片盒中，-80℃避光保存。

四、HE染色实验步骤

1、苏木素染细胞核：切片入Harris苏木素染5-10min，自来水洗，1%的盐酸酒精分化数秒，自来水冲洗10分钟，PBS返蓝5分钟，流水冲洗。

2、伊红染细胞质：切片入伊红染液中染色1-3min。

3、脱水封片：将切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-无水乙醇Ⅰ5min -无水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。

4、显微镜镜检，图像采集分析。

染色结果：细胞核蓝色，细胞质红色。