一、实验器材及试剂

1、 实验器材

2、 主要实验试剂

二、 冰冻切片免疫荧光实验步骤

1、 染色：从冰箱取出冰冻切片，室温复温半小时，冰冻切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈（防止抗体流走），在圈内滴加ROS染液，避光恒温箱37°孵育30min。

2、 DAPI复染细胞核：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加DAPI染液，避光室温孵育10min。

3、 封片：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。

4、 镜检拍照：切片于荧光显微镜下观察并采集图像。（DAPI紫外激发波长330-380nm，发射波长420nm，发蓝光；FITC激发波长465-495nm，发射波长515-555 nm，发绿光；CY3激发波长510-560，发射波长590nm，发红光）

三、 冰冻切片免疫荧光实验结果判读

DAPI染出来的细胞核在紫外的激发下为蓝色，阳性表达为相应荧光素标记的红光。