一、实验器材及试剂

1、 实验器材

2、 主要实验试剂

二、 OCT包埋

1. 新鲜组织取材后，按实验目的进行修剪。应在离体30min内进行快速OCT包埋。

2. 包埋盒底部滴入OCT，覆盖包埋盒的底部。

3. 将组织放入包埋盒中，根据组织形状调整组织的位置。组织上覆盖OCT，将组织完全覆盖。避免产生气泡。

三、冰冻切片

1. 组织块固定在切片机上，调节冰冻温度调节器，在冷冻台上冰冻组织块。室温停留片刻，再进行切片。

2. 调整切片机刀片到适当的位置和角度，试切出完整连续的切片以确定最合适的条件。

3. 正式切片前应先对组织块修片并暴露出需要的切面。进行快速连续切片，选择合适的切片附贴在载玻片上，并做好标记。

4. 剩余冰冻组织干燥后放入冰冻切片盒中，-80℃避光保存。

四、油红O染色实验步骤

1、新鲜冰冻切片固定：将冰冻切片复温干燥，固定液中固定15min，自来水洗，晾干。

2、油红染色：切片入油红染液浸染8-10min (加盖避光)。

3、背景分化：取出切片，停留3s后依次浸入两缸60%异丙醇分化，各3s、5s。切片依次浸入2缸纯水中浸洗，各10s。

4、苏木素染色：取出切片，停留3s后浸入苏木素复染3-5min，3缸纯水浸洗，各5s、10s、30s。盐酸分化液分化2-8s，2缸蒸馏水洗各10s，返蓝液返蓝3min，将切片轻轻浸入2缸自来水中浸洗，各5s、10s，镜检染色效果。

5、封片：甘油明胶封片剂封片。

6、显微镜镜检，图像采集分析。

染色结果：脂滴呈橘红色至鲜红色，细胞核蓝色