链霉亲和素琼脂糖微球
[产品信息]
链霉亲和素是阿维丁链霉菌(streptomyces avidinii)分泌的蛋白,以同源四聚体的形式存在,每摩尔可高度特异性结合4摩尔生物素分子,其非特异性结合率远低于亲和素,广泛应用于各种生化和免疫检测的信号放大系统中。琼脂糖微球共价结合的链霉亲和素是一种固定化重组链霉素亲和素蛋白的微珠状树脂,可用于生物素化蛋白、抗体、核酸等分子的捕获、纯化和免疫沉淀等操作。
[性能参数]
基质 | 高度交联4 % 琼脂糖 |
粒径范围 | 45-165 μM |
平均粒径 | 90 μM |
结合载量 | 1 mg(生物素化抗体)/mL(微球) |
化学稳定性 | 所有常用缓冲溶液中稳定 |
保存溶液 | 0.01M PBS (pH7.4),0.05 % proclin300 |
保存温度 | 4 ℃ |
[适用范围]
此产品可用于多种生物素化的生物分子的捕获、纯化和免疫沉淀等实验。
[实验步骤]
下面给出的方法是纯化生物素化蛋白的一般步骤。根据蛋白质的类型,可能需要对方案进行特定的修改。
缓冲液:
结合缓冲液:0.01M PBS,pH 7.2-7.4。
洗脱缓冲液:100 mM glycine,pH 2.2-2.8。
1. 进行链霉亲和素琼脂糖微球树脂的装填(适用于各种中压色谱层析柱的填装)。
2. 将制备好的层析柱连接到色谱系统中。用5倍柱体积的结合缓冲液平衡树脂。
3. 将生物素化蛋白样品加入层析柱中,保证样品与树脂充分接触,室温孵育1-2h。
4. 用至少10倍柱体积的结合缓冲液清洗树脂,去除非特异性吸附的杂蛋白。
5. 用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液洗脱结合的生物素化样品。
6. 根据下游应用,采用合适的缓冲液进行透析,保存纯化后的样本。
7. 将链霉亲和素琼脂糖微球树脂进行清洗和保存。
[验证数据]
经链霉亲和素琼脂糖微球纯化后的生物化分子的SDS-PAGE检测结果:
Figure. SDS-PAGE
[储存及有效期]
未开封4℃保存,有效期12个月;开封后4℃保存1-2周,尽快使用。如需多次使用,请在保存时添加0.03% proclin300。
[注意事项]
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。